CORRELACIÓN DEL MÉTODO KJENDAHL TRADICIONAL CON EL MÈTODO DUMAS
AUTOMATIZADO PARA LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA EN GRANOS
Ana L. Cruz Lugo, Alma D. Román Gutiérrez, Otilio A. Acevedo Sandoval, Eva M. Santos López
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. Centro de Investigaciones Químicas. Carr. Pachuca – Tulancingo
Km. 4.5 Ciudad Universitaria, Pachuca, Hidalgo
emsantos@uaeh.reduaeh.mx
Palabras clave: Granos, Proteína Total, Método Kjendahl, Método Dumas Introducción. La determinación de proteína total es una
las fases esenciales del análisis proximal de alimentos
debido a su importancia tanto fisiológica como
composición. El método Kjendahl actualmente sigue siendo
la técnica más confiable para la determinación de nitrógeno
orgánico (1). Como consecuencia, se incluye en métodos
oficiales aprobados por organizaciones internacionales
además de que los resultados obtenidos por Kjendahl se
utilizado para calibrar métodos automáticos (2). El método
Kjendahl empledado para este estudio es el método AOAC
2.062 (3). Se trata de una combustión húmeda que
cobre como catalizador. La materia orgánica es oxidada
CORRELACIÓN DEL MÉTODO KJENDAHL TRADICIONAL CON EL MÈTODO DUMAS
AUTOMATIZADO PARA LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA EN GRANOS
Ana L. Cruz Lugo, Alma D. Román Gutiérrez, Otilio A. Acevedo Sandoval, Eva M. Santos López
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. Centro de Investigaciones Químicas. Carr. Pachuca – Tulancingo
Km. 4.5 Ciudad Universitaria, Pachuca, Hidalgo
emsantos@uaeh.reduaeh.mx
Palabras clave: Granos, Proteína Total, Método Kjendahl, Método Dumas
Introducción: La determinación de proteína total es una de las fases esenciales del análisis proximal de alimentos debido a su importancia tanto fisiológica como de composición. El método Kjendahl actualmente sigue siendo la técnica más confiable para la determinación de nitrógeno orgánico (1). Como consecuencia, se incluye en métodos oficiales aprobados por organizaciones internacionales además de que los resultados obtenidos por Kjendahl se han utilizado para calibrar métodos automáticos (2). El método Kjendahl empledado para este estudio es el método AOAC 2.062 (3). Se trata de una combustión húmeda que usa cobre como catalizador. La materia orgánica es oxidada por ácido sulfúrico y el nitrógeno orgánico se fija como sulfato de amonio; esta sal se hace reaccionar con una base fuerte para desprender amoniaco que se destila y se recibe en un ácido débil que se titula con un ácido fuerte de concentración conocida. Considerando la preparación de las muestras, el análisis y la limpieza, se estima un tiempo de 10 horas de análisis por cada lote de 8 muestras.
Otro método para le determinación de proteína bruta es el Método de Análisis por Combustión o método Dumas, basado en la conversión de los gases de combustión. La liberación de Nitrógeno se lleva a cabo mediante pirólisis en una cámara de combustión, el nitrógeno es transportado con la ayuda de un gas hacia un detector en donde se realiza la mediciòn. La compañía LECO Corporation (St. Joseph, MI, 2002) tiene en el mercado el determinador de Nitrógeno/Proteína FP-528, utilizado para éste trabajo, y que cuantifica el Nitrógeno de forma sistematizada y automatizada basándose en el método de combustión Dumas, AOAC 990.03(3).
El equipo FP-528 consta de una cámara de oxígeno donde se lleva a cabo la combustión a una temperatura de 850°C, una celda de termoconductividad y un microprocesador para llevar a cabo los cálculos y controlar los parámetros operativos. Los gases requeridos para su operación son Oxígeno (para la cámara de combustión) aire comprimido (control de presión neumática) y Helio (gas de transporte). El tiempo de análisis para una muestra es de aproximadamente 3 minutos y los resultados se expresaron como % de proteína (de acuerdo al factor de conversión). El objetivo del presente trabajo es comprobar que tanto el método tradicional como el equipo FP-528 proporcionan valores análogos de contenido de proteína bruta en granos.
Metodología: Se analizaron XX muestras por triplicado de granos (cereales, semillas y oleaginosas) previamente triturados y desecados. Se pesaba aproximadamente 0.1 g. en capsulas de aluminio para el análisis en el equipo LECO FP528 y alrededor de 1 g. para el método tradicional. Los factores de conversión para obtener el porcentaje de proteína se muestran en la Tabla 1.
Resultados y discusión: Los resultados obtenidos se muestran en la Figura 1. Se obtuvo una correlación lineal entre variables de 0.974 con una pendiente de 1.0064 que indica que tanto el método Kjendahl como el equipo LECO-FP528 nos dan valores análogos de nitrógeno.
Figura 1: Representación gráfica de los % de proteína por ambos métodos.
Conclusiones: El determinador LECO FP-528 nos proporciona una medida de proteína altamente correlacionada con el valor obtenido por el método tradicional, lo que le convierte en una alternativa confiable para la medida de proteína en productos alimenticios.
Bibliografía
(1) R.S. Kir, R. Sawyer, H. Egan. Composición y análisis de alimentosde pearson. Quinta reimpresión, Compañía editorial continetal. Mèxico, 2002. pag. 19-23. (2) M. E. Watson y T. L. Galliher (2002). Comparison of Dumas and Kjeldahl methods with automatic analyzers on agricultural samples under routine rapid analysis conditions. Communications in Soil Science and Plant Analysis,Volume 32, Number 13-14 / 2001 p.p.2007 – 2019. (3) Association of Official Analytical Chemists. Official Methods of Analysis, 14th Ed. The Association: Arlington, VA, 1984.
HOLA SOY TESISTA DEL DR ALANIS Y NECESITO CITAR ESTE ART. PERO NECESITO EL AÑO. ESPERO SU RESPUESTA
GRACIAS
Por: CINTHYA el 22/09/2009
a las 5:02 AM
Estimada Cinthya,
Gracias por tu interés.
Este trabajo fue desarrollado durante el año 2006.
Te estoy enviando a tu correo el original en pdf.
Saludos !
Por: Juan Ruffino el 23/09/2009
a las 12:48 AM
Hola, estoy trabajando con determinacion de proteina total en muestras de cereales, por lo que estoy interesada en la informacio que ustedes obtuvieron, queria ver si me podrian mandar el pdf para leerlo mas a fondo.
Muchas gracias!
Por: Elsa Esquer el 14/04/2010
a las 5:43 PM
No es una respuesta, es un comentario, como autor del articulo antes presentado, pues les agradezco sus comentarios e intere en este tipo de estudios, para su conocimiento o como informacion este estudio es solo una parte de un extenso estudio en el area de alimentos, incluyendo carnicos, lacteos, granos, semillas y productos del mar.
Saludos
Ana Laura Cruz Lugo
Por: Ana Laura Cruz Lugo el 25/05/2010
a las 9:42 PM
Excelente trabajo
Por: Maycol Antón Sandoval el 27/08/2010
a las 2:20 PM
Estimados, me desempeño en el área de calidad de una empresa que fabrica proteínas en polvo a partir de suero de queso y estoy interesado en la correlación de los métodos Kjeldahl-Dumas para productos lácteos, en particular los de alto contenido de proteínas, agradecería me enviaran información al respecto, gracias.
Por: Iván Domínguez el 31/08/2010
a las 2:42 PM
Hola Javier,
Por alguna razón to nota recién me llega.
Te comento que NESTLE es el rprincipal usuario del método dumas.
De hecho ellos tiene una analizador LECO FP528C en Guatemala, en el Lab. Regional para Centroamérica y el Caribe. En el primer trimeste van a comprar el modelo LECO TruMac para muestras macro ( 3g ). Voy a conversar con ellos para pasarte los estudios que hicieron.
Saludos !
Juan RUFFINO
Por: Inboxsa el 05/10/2010
a las 8:37 PM
buen dia!
estoy interesada en el trabajo que muestran en este articulo, como puedo obtener el articulo completo?? Espero puedan ayudarme…gracias!!
Por: laura el 05/10/2010
a las 8:29 PM
Buen día Laura,
El artículo que ves publicado es el artículo completo.
Nos obstante te lo envío en .pdf a tu correo.
Gracias por contactarnos.
Saludos !
Juan RUFFINO
Por: Inboxsa el 05/10/2010
a las 8:56 PM
HOLA, ESTOY TRABAJANDO CON EL FP 528 PARA DETERMINAR PROTEINAS EN HARINA DE PESCADO Y KIERO AMPLIARLO A ALIMENTOS DIVERSOS…NECESITO INFORMACION SOBRE LA CALIBRACION A EMPLEAR Y MRC A UTIZAR…PARA LO K HAGO USO CALIBRACION CON EDTA Y KIERO SABER SI PUEDO SEGUIR USANDOLO Y ABARCAR LOS ALIMENTOS…
GRACIAS DE ANTEMANO POR LA INFORMACION BRINDADA
Por: RONALD el 01/11/2010
a las 7:55 PM
Hola Ronald, buenas tardes !
Gracias por tu contacto.
Sin duda puedes seguir usando el EDTA para calibrar tu instrumento.
Recuerda que el método de combustión directa elimina el efecto matriz, por lo que puedes utilizar la misma curva de calibración para harinas y otros alimentos.
Inclusive para otro tipo de muestras como fertilizantes.
Saludos !
Juan
Por: Inboxsa el 01/11/2010
a las 8:11 PM
Gracias por tu respuesta Juan es muy certero lo que me dices, sin embargo necesito mas pautas para desarrollar esta ampliacion que quiero hacer y los controles de calidad y muestras de referencia que debo incluir para asegurar la calidad de mis resultados obtenidos.Actualmente genero una curva de calibracion con la misma harina de pescado en 4 niveles de nitrogeno y estan trazados al EDTA Y obviamente la matriz que trabjo cae dentro de mis niveles de nitrogeno de dicha curva de calibracion,como haria para esta ampliacion mezclando la unica matriz que trabajo actualmente con las otras matrices de alimentos diversos(soya, papilla,cereales, harinas diversas,etc? que por cierto son menos frecuentes en mi area de trabajo por el momento?….Sinceramente Soy nuevo en este rubro y necesito mucha informacion para realizar este trabajo de la mejor manera, quiero saber ante todo como se genera EL SOFTWARE la curva de calibracion con el EDTA(ES AREA VS PESO EDTA)Y QUE PESO SE DEBE CONSIDERAR PARA EL BLANCO?
Por: RONALD el 01/11/2010
a las 10:04 PM
Ronald,
El tema es bastante largo para tratarlo en este blog.
Escribime al correo diciéndome de qué país me escribes. Yo le voy a decir a al representante de LEECO en tu país que te contacte y te ayude con lo que planteas.
Saludos !
Juan
Por: Juan el 01/11/2010
a las 10:26 PM
Hola, hace muchos años que no realizo investigación, desde el año 1991,soy Ingeniera Agronoma y tambien he realizado el curso de Perito clasificador de cereales y oleginosas. Por motivos personales, tuve que abandonar lo que me encantaba hacer, investigación. Luego de 19 años, se han producido innovaciones muy grandes, la pregunta que les hago, es porque no exponen el coeficiente de variación del ensayo, para poder analizar mejor el excelente grado de correlación que demuestra la recta pertinente. Ya que trabajaron con muestras triplicadas. ¿No es necesario?. Un saludo afectuoso.
Por: Cristina el 02/12/2010
a las 11:29 PM
Estimada Cristina,
Gracias por escribirnos.
Lo que Ud. comenta es cierto, pero es una atribución del autor incluir ese dato o no.
Generalmente el dato del valor de la pendiente es suficiente para conocer el grado de correlación. Yo comparto con Ud. que mientras más datos uno vea mejor interpretación del caso puede hacer, pero también es cierto que algunas personas no evalúan correctamente toda la información estadística suministrada.
Saludos Cordiales !
Juan
Por: Juan el 17/12/2010
a las 6:27 PM
GRACIAS POR SU ATENCION AMIGO, SALUDOS CORDIALES ESTAMOS EN CONTACTO. HASTA PRONTO C.D.T.
Por: Luis Enrique D. C. el 23/03/2012
a las 1:27 AM
OK Gerardo, te lo enviamos a tu e-mail.
Saludos !
Juan
Por: Inboxsa el 19/02/2011
a las 7:40 PM